化学发光免疫分析技术分析

化学发光免疫分析是化学发光与免疫分析相结合的方法,以化学发光剂、催化发光酶等物质标记抗原或抗体,当被标记的抗原或抗体与相应抗体、抗原相结合后,发光底物受发光剂、催化酶等物质作用,发生氧化还原反应。反应中释放出的可见光由配套设备进行采集与处理,获取测定物浓度,从而达到测定目的。
 
近年来,化学发光免疫分析以其灵敏度高、线性动力学范围宽、光信号持续时间长、分析方法简便快速、结果稳定、误差小、安全性好及使用期长等优点成为了检验界研究的焦点,在临床诊断、食品安全、环境监测、药物分析中得到了广泛运用。在临床诊断中,化学发光免疫分析目前主要用于传染病、肿瘤、甲功、激素的检测,这些检测项目占测试总量的75%~80%,占市场金额的60%。
 
化学发光免疫分析技术分类
化学免疫发光技术主要有直接化学发光、酶促化学发光、电化学发光。
(1)直接化学发光
鲁米诺类标记的化学发光免疫分析:鲁米诺类物质的发光为氧化反应发光。在碱性溶液中,鲁米诺可被许多氧化剂氧化发光,其中H2O2最为常用。
吖啶酯类标记的化学发光免疫分析:吖啶酯在H2O2和OH-条件下,能迅速发光,吖啶酯衍生物标记效率高且稳定性好,发光体系简单、成本低,具有较低本底且能快速检测。 
(2)酶促化学发光
酶促化学发光属酶免疫分析,只是酶反应的底物是发光剂。以酶标记生物活性物质进行免疫反应,免疫反应复合物上的酶再作用于发光底物,在信号试剂作用下发光,用发光信号测定仪进行发光测定。目前常用的标记酶为辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(ALP)。
酶促发光信号强而稳定,发光时间较长,检测方式简单、成本较低,但是工作曲线可能随时间漂移,而且低端斜率容易呈非线性下移。
(3)电化学发光免疫分析
电化学发光免疫分析是指由电化学反应引起的化学发光过程。ECL的反应在电极表面进行,发光底物为三联吡啶钌,以三丙胺(TPA)来激发光反应,它包括电化学和化学发光两个过程。其标记物非常稳定,发光时间长,灵敏度高,线性范围宽,反应时间短。
 
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